Difference between revisions of "Team:TU Delft/Notebook"
Line 185: | Line 185: | ||
<div class="panel-heading panel-title" role="tab" id="heading2"> | <div class="panel-heading panel-title" role="tab" id="heading2"> | ||
<a class="collapsed" role="button" data-toggle="collapse" data-parent="#accordionprotocols" href="#collapse2" aria-expanded="false" aria-controls="collapse2"> | <a class="collapsed" role="button" data-toggle="collapse" data-parent="#accordionprotocols" href="#collapse2" aria-expanded="false" aria-controls="collapse2"> | ||
− | + | Transformation | |
</a> | </a> | ||
</div> | </div> | ||
<div id="collapse2" class="panel-collapse collapse" role="tabpanel" aria-labelledby="heading2"> | <div id="collapse2" class="panel-collapse collapse" role="tabpanel" aria-labelledby="heading2"> | ||
<div class="panel-body"> | <div class="panel-body"> | ||
− | + | <ol style="list-style: decimal inside; font-size:19px;"> | |
+ | <li><p class="lead">Take the competent cells from the storage at -80ºC and leave them on ice for 10-15 min</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Add 1-2 µL of plasmid solution to the 50 µL cell tube</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Incubate on ice for 30 min</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Heat-shock the cells at 42ºC for 45s</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Incubate on ice for 2 min</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Add 500 µL of LB media and incubate 60 min at 37ºC</p></li> | ||
+ | |||
+ | <li><p class="lead">Plate the cultures on agar plate</p></li> | ||
+ | </ol> | ||
</div> | </div> | ||
</div> | </div> |
Revision as of 14:33, 4 August 2015
Notebook Title
Subtitle
Overview
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Work Space
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
General Material Preparation
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Interlab Study
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Module 1
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Module 2
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Module 3
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Protocols
Subtitle or summary goes here. Should be short - two or three sentences.
Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Praesent ultrices tincidunt ipsum, vitae tempor nibh porta ac. Fusce consectetur neque et dolor vestibulum iaculis. Nunc pretium turpis at arcu tempus vehicula. Nam nec accumsan metus, ac tempus tortor. Aenean euismod elit vitae ex ultrices pulvinar. Etiam rhoncus non urna vel volutpat. Donec ut erat ornare, faucibus quam a, posuere urna. Phasellus at nisl sed erat ultricies commodo vel ut mauris. Morbi ac mauris dui. Cras sit amet ornare nisl. Suspendisse lectus mi, ullamcorper et dolor a, vulputate condimentum velit. Morbi dolor eros, cursus euismod magna sit amet, tempus volutpat quam. Morbi at est sed erat efficitur lobortis nec non elit. Integer urna nisi, dapibus nec magna non, pharetra sodales felis. Fusce dignissim elit sit amet purus aliquet, quis luctus tortor commodo. Donec viverra enim vel ultrices iaculis.
Plate Top10 cells and incubate at 37ºC overnight
Pick one colony, inoculate in LB media and incubate overnight while shaking at 37ºC
Dilute the culture in fresh medium, and continue the incubation until the OD600= 0.4-0.6
Centrifugation 5 min. at 4000 rpm.
Pellet cells and resuspend in 100mM of CaCl2 solution
Incubate on ice for 20 min
Centrifugation 5 min at 3000 rpm
Pellet cells and suspend again in 100mM CaCl2 solution
Incubate on ice for 60 min
Centrifugation 5 min at 3000 rpm
Add a solution of 100mM CaCl2 + 40% glycerol
Store immediately at -80ºC
Take the competent cells from the storage at -80ºC and leave them on ice for 10-15 min
Add 1-2 µL of plasmid solution to the 50 µL cell tube
Incubate on ice for 30 min
Heat-shock the cells at 42ºC for 45s
Incubate on ice for 2 min
Add 500 µL of LB media and incubate 60 min at 37ºC
Plate the cultures on agar plate