Difference between revisions of "Team:Bielefeld-CeBiTec/Media"

Line 74: Line 74:
 
             </div>
 
             </div>
 
             <div id="collapseThree" class="panel-collapse collapse">
 
             <div id="collapseThree" class="panel-collapse collapse">
 +
                <div class="panel-body">
 +
                    <ul>
 +
                        <li>For each litre of solution: </li>
 +
                            <ul>
 +
                                <li>242 g Tris Base (MW=121.1) </li>
 +
                                <li>57.1 ml Glacial Acetic Acid </li>
 +
                                <li>100 ml 0.5 M EDTA </li>
 +
                            </ul> <br>
 +
                                <li>mix Tris with stir bar to dissolve in about 600 ml of ddH<sub>2</sub>O. </li>
 +
                                <li>add the EDTA and Acetic Acid. </li>
 +
                                <li>bring final volume to 1 l with ddH20. </li>
 +
                                <li>store at room temperature. </li> <br>
 +
                                <li>Note: Final (1x) working concentration: </li>
 +
                                    <ul>
 +
                                        <li>0.04 M Tris - Acetate </li>
 +
                                        <li>0.001 M EDTA </li>
 +
                                    </ul>
 +
                    </ul>
 +
                </div>
 +
            </div>
 +
        </div>
 +
                    <div class="panel panel-default">
 +
            <div class="panel-heading">
 +
                <h4 class="panel-title">
 +
                    <a data-toggle="collapse" href="#collapseFour">Lysis and binding buffer for purification of lacI</a>
 +
                </h4>
 +
            </div>
 +
            <div id="collapseFour" class="panel-collapse collapse">
 +
                <div class="panel-body">
 +
                    <ul>
 +
                        <li>For each 200 ml of solution: </li>
 +
                            <ul>
 +
                                <li>5.844 g NaCl </li>
 +
                                <li>0.272 g imidazole </li>
 +
                                <li>5.8 ml of 86 % glycerol </li>
 +
                                <li>0.406 g MgCl<sub>2</sub></li>
 +
                                <li>0.2 g lysozyme</li>
 +
                            </ul> <br>
 +
                                <li>Add all these ingredients to a 50 mM sodium phosphate buffer (pH 8.0). Prior to use add DTT to a final concentration of 1mM. </li>
 +
                       
 +
                                <li>store at room temperature. </li> <br>
 +
                                <li>Note: Final (1x) working concentration: </li>
 +
                                    <ul>
 +
                                        <li>0.04 M Tris - Acetate </li>
 +
                                        <li>0.001 M EDTA </li>
 +
                                    </ul>
 +
                    </ul>
 +
                </div>
 +
            </div>
 +
        </div>
 +
                    <div class="panel panel-default">
 +
            <div class="panel-heading">
 +
                <h4 class="panel-title">
 +
                    <a data-toggle="collapse" href="#collapseFive">50X TAE Stock Solution</a>
 +
                </h4>
 +
            </div>
 +
            <div id="collapseFive" class="panel-collapse collapse">
 +
                <div class="panel-body">
 +
                    <ul>
 +
                        <li>For each litre of solution: </li>
 +
                            <ul>
 +
                                <li>242 g Tris Base (MW=121.1) </li>
 +
                                <li>57.1 ml Glacial Acetic Acid </li>
 +
                                <li>100 ml 0.5 M EDTA </li>
 +
                            </ul> <br>
 +
                                <li>mix Tris with stir bar to dissolve in about 600 ml of ddH<sub>2</sub>O. </li>
 +
                                <li>add the EDTA and Acetic Acid. </li>
 +
                                <li>bring final volume to 1 l with ddH20. </li>
 +
                                <li>store at room temperature. </li> <br>
 +
                                <li>Note: Final (1x) working concentration: </li>
 +
                                    <ul>
 +
                                        <li>0.04 M Tris - Acetate </li>
 +
                                        <li>0.001 M EDTA </li>
 +
                                    </ul>
 +
                    </ul>
 +
                </div>
 +
            </div>
 +
        </div>
 +
                    <div class="panel panel-default">
 +
            <div class="panel-heading">
 +
                <h4 class="panel-title">
 +
                    <a data-toggle="collapse" href="#collapseSix">50X TAE Stock Solution</a>
 +
                </h4>
 +
            </div>
 +
            <div id="collapseSix" class="panel-collapse collapse">
 
                 <div class="panel-body">
 
                 <div class="panel-body">
 
                     <ul>
 
                     <ul>

Revision as of 19:58, 6 July 2015

iGEM Bielefeld 2015


Media

LB

  • For 1 liter LB:
    • 20 g LB powder
    • Fill the bottle with deionized H2O

  • For 1 liter LB-plates:
    • 18 g LB powder
    • 16 g Select Agar
    • Fill the bottle with deionized H2O

SOC

  • Add the following components for 900 ml of distilled H2O:
    • 20 g Trypton
    • 5 g Bacto Yeast Extract
    • 2 ml of 5 M NaCl
    • 2.5 ml of 1 M KCl
    • 10 ml of 1 M MgCl2
    • 10 ml of 1 M MgSO4
    • 20 ml of 1 M glucose

Buffers

50X TAE Stock Solution

  • For each litre of solution:
    • 242 g Tris Base (MW=121.1)
    • 57.1 ml Glacial Acetic Acid
    • 100 ml 0.5 M EDTA

  • mix Tris with stir bar to dissolve in about 600 ml of ddH2O.
  • add the EDTA and Acetic Acid.
  • bring final volume to 1 l with ddH20.
  • store at room temperature.

  • Note: Final (1x) working concentration:
    • 0.04 M Tris - Acetate
    • 0.001 M EDTA

Lysis and binding buffer for purification of lacI

  • For each 200 ml of solution:
    • 5.844 g NaCl
    • 0.272 g imidazole
    • 5.8 ml of 86 % glycerol
    • 0.406 g MgCl2
    • 0.2 g lysozyme

  • Add all these ingredients to a 50 mM sodium phosphate buffer (pH 8.0). Prior to use add DTT to a final concentration of 1mM.
  • store at room temperature.

  • Note: Final (1x) working concentration:
    • 0.04 M Tris - Acetate
    • 0.001 M EDTA

50X TAE Stock Solution

  • For each litre of solution:
    • 242 g Tris Base (MW=121.1)
    • 57.1 ml Glacial Acetic Acid
    • 100 ml 0.5 M EDTA

  • mix Tris with stir bar to dissolve in about 600 ml of ddH2O.
  • add the EDTA and Acetic Acid.
  • bring final volume to 1 l with ddH20.
  • store at room temperature.

  • Note: Final (1x) working concentration:
    • 0.04 M Tris - Acetate
    • 0.001 M EDTA

50X TAE Stock Solution

  • For each litre of solution:
    • 242 g Tris Base (MW=121.1)
    • 57.1 ml Glacial Acetic Acid
    • 100 ml 0.5 M EDTA

  • mix Tris with stir bar to dissolve in about 600 ml of ddH2O.
  • add the EDTA and Acetic Acid.
  • bring final volume to 1 l with ddH20.
  • store at room temperature.

  • Note: Final (1x) working concentration:
    • 0.04 M Tris - Acetate
    • 0.001 M EDTA